雙抗混合液(100X)用于預防細胞培養的細菌污染,特別是革蘭氏陽性和陰性細菌的污染。產品經過濾除菌處理,可以直接添加到細胞培養液內。青霉的含量為10kU/ml,含量為10mg/ml.在細胞培養液中推薦的青霉的工作濃度為100U/ml,鏈霉的工作濃度為0.1mg/ml。即按照100倍稀釋使用即可。
核心操作要點如下:
一、配制與保存
工作濃度:按1:100比例稀釋(如5ml雙抗母液+495ml培養基),終濃度青霉素100U/ml、鏈霉素0.1mg/ml。
保存條件:母液需-20℃避光保存,避免反復凍融(≤3次);工作液需2周內用完。
二、使用流程
實驗前準備:徹底清除舊培養基,PBS潤洗后加入預溫的雙抗培養基。
無菌操作:在超凈臺內完成,使用無菌移液器具,開蓋后優先分裝母液。
解凍與溶解:母液需2-8℃緩慢解凍,若出現結晶可37℃溫育20-30分鐘或輕輕搖勻,禁止劇烈震蕩。
注意事項:
避免污染:操作全程需無菌,母液分裝后使用,減少污染風險。
濃度控制:過高濃度易致細胞毒性,需嚴格按比例稀釋。
特殊場景:
難抑菌污染:改用含慶大霉素或兩性霉素B的三抗溶液。
無血清培養:選擇無動物源成分的合成抑菌劑。
流式細胞術干擾:選用無酚紅配方的雙抗溶液。